
ELISA試劑盒實驗的標準曲線和測定的重復性差,這是什么原因造成的?
答:試驗的標準曲線和測定的重復性差,這是典型的由測定操作引起的問題,常見原因如下:

可能原因:加樣本及試劑量不準;孔間不一致;
解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密。
重復某一樣品時,加樣時間盡可能與次接近;
重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應充分混勻。
可能原因:加樣過快,孔間發生污染;
解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。
可能原因:加錯樣本;
解決方法:加樣槍頭不要貼壁。
可能原因:不同批號試劑盒中組分混用;
解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯樣本。
可能原因:加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區;
解決方法:不同批號試劑盒中組分不可混用。
可能原因:溫育時間、洗板、顯色時間不一致;
解決方法:檢查時間是否一致。
可能原因:孔內污染雜物;
解決方法:離心樣品,排除雜物。
可能原因:試劑/樣品沒有混勻;